液相色谱是翻开未知物资天下的大门。科研中的良多题目都能在色谱图中很好地反映出来。有些题目能够经由进程转变装备参数来处置，而有些题目必须经由进程操纵法式来点窜。究竟结果，挑选适合的色谱柱和活动相是取得杰出色谱的关头。


　　在液相色谱分手进程中，咱们常常会碰到六个罕见的题目。每个题目都能够经由进程利用恰当的体例来开辟战略和东西来防止。


　　一、峰尾


　　峰值拖尾


　　1.屏幕被盖住了


　　若是色谱柱两头的滤网梗塞，样品会在筛板中梗塞构成提早，样品在柱后流出时峰形会构成尾部。能够经由进程反吹塔或改换筛板来处置。


　　2.折叠列


　　是指色谱柱因其余缘由落空柱效，没法保留物资，使物资不停留在牢固相上，随活动相流出，但仍有一点柱效，从而构成拖尾。能够经由进程从头加载或替代列来处置。


　　3.净化


　　样本不在统一条起跑线上，从前面跑到最初，显露尾巴。改换色谱柱或用无机溶剂梯度冲刷色谱柱1小时以上便可处置。


　　4.活动相PH值挑选毛病


　　若是某些样品在必然的pH值下，份子型和离子型之间存在静态均衡，那末离子型会逐步向份子型显现拖尾。调理pH值能够按捺份子解离，改良拖尾景象。对碱性化合物，绝对较低的pH值更有益于取得对称的峰。


　　二、岑岭前


　　岑岭前


　　1.样本过载


　　保留的样品在一般峰前延续开释，构成前峰，从而下降样品含量。


　　2.溶剂挑选不妥


　　当样品溶剂的洗脱才能远强于活动相时，会呈现峰锋。比方，反相色谱中利用腈作为样品溶剂时，活动相的洗脱才能较弱。峰锋会呈现。这个题目能够经由进程挑选活动相或类似比例的活动相作为样品溶剂来处置。


　　3.立柱破坏


　　柱效丧失，无物料滞留。只能经由进程改换色谱柱来处置。


　　4.一个小峰呈现在大峰之前，也便是设想中的锋峰。即小峰埋在大峰之前，能够经由进程调理活动相的洗脱梯度来处置。


　　第三，基线漂移


　　基线漂移


　　1.柱温动摇


　　即便很小的温度变更也会引发基线动摇，这凡是会影响差分探测器、电导探测器、低活络度紫外探测器或其余光电探测器。能够经由进程利用柱温箱和在检测器前利用热互换器来节制柱温度和活动相的温度来处置。


　　2.不平均活动相


　　前提变更引发的基线漂移大于温度引发的基线漂移。能够用HPLC级溶剂处置，活动相利用前要脱气。


　　3.活动池被净化或有气体


　　用甲醇或其余强极性溶剂冲刷活动池。若有须要，利用1N硝酸(不要利用盐酸)。4.流量比或流量变更不妥


　　比例或流量。为防止此题目，请按期查抄活动相的成份和流速。


　　5.样本中有激烈的保留定见


　　芋头峰以逐步增添的基线形式洗脱。这能够经由进程利用掩护柱来处置。若有须要，在进样之间或阐发进程中，按期用强溶剂洗濯色谱柱。


　　第四，更宽的山岳


　　更宽的山岳


　　1.因为色谱柱净化或生效，塔板数削减：改换不异范例的新色谱柱。若是新色谱柱供给对称的峰，用强溶剂洗濯旧色谱柱。


　　2.色谱柱与检测器之间的管道太长或管道内径过大：改换内径较小的短管道。


　　3.检测器对反映时候或池体积的过分呼应能够经由进程耽误呼合时候或利用更小的活动池来处置。


　　五.基线乐音


　　基线噪声


　　1.活动相、检测器或泵中有氛围(尖峰):确保对活动相停止脱气，并冲刷体系以去除检测器或泵中的氛围。


　　2.泄露：查抄管讨论是不是松动，泵是不是泄露，是不是有盐析和异响。若有须要，改换泵密封件。


　　3.活动相夹杂不完整：用手或利用低粘度溶剂充实夹杂。


　　4.温度影响(柱温太高或检测器未加热):利用柱温箱下降温差或增添换热器。


　　5.统一线路上的其余电子装备(不测乐音):断开LC、检测器和记实仪，查抄搅扰是不是来自内部，并停止校订。利用紧密稳压电源。


　　第六，抉择不够充实


　　分辩率缺乏


　　1.活动相梯度洗脱设置分歧理：优化梯度洗脱法式。


　　2.活动相净化或蜕变(致使保留时候转变):从头设置装备摆设活动相。


　　3.掩护柱或阐发柱梗塞：取下掩护柱停止阐发，须要时改换；若是阐发柱梗塞，能够停止反冲刷；若是题目延续存在，色谱柱能够会被激烈残留的净化物破坏。再生打算；若是题目依然存在，能够是进口梗塞。测验考试改换进口处的滤网或改换色谱柱。